查特細胞凍存是將活性細胞保存在低溫下,以便長期保存和使用的方法。液氮容器細胞凍存是一種常見的細胞凍存方式,因為液氮可以提供極低的溫度保護細胞免受損害。查特公司將詳細介紹液氮容器細胞凍存的步驟。
第一步:準備細胞
在進行細胞凍存之前,首先需要準備要凍存的細胞。這包括選擇適合凍存的細胞線,確保細胞在生長期并且健康,以及從培養(yǎng)皿中收集細胞。
第二步:制備凍存液
制備凍存液是細胞凍存的關鍵步驟之一。凍存液的成分根據(jù)所凍存細胞類型的不同而異,但通常包括細胞的基礎培養(yǎng)液和10-20%的細胞保護劑,如甘油或DMSO(二甲基亞砜)。細胞保護劑可以防止細胞在凍結和解凍過程中受到損害。
第三步:混合細胞和凍存液
將收集到的細胞和凍存液混合,通常使用無菌管進行。混合后輕輕搖晃管子,確保細胞與凍存液均勻混合。
第四步:分裝
將混合好的細胞凍存液分裝入冷凍管中。通常建議一次性分裝1-2ml的混合液??梢允褂脦в忻芊馍w的無菌管或螺旋蓋冰凍管進行分配。
第五步:緩慢降溫
將分裝好的冰凍管從室溫緩慢降溫到-80℃。這可通過將管子放置在冰桶中,然后逐漸將冰桶移動到低溫冰箱中實現(xiàn)。冷卻過程需要盡量緩慢,以便混合物中的冷卻劑均勻分布并防止細胞受到損害。
第六步:轉移到查特液氮容器
一旦樣品降溫到-80℃,就可以將其轉移到液氮容器中進行長期保存。液氮可以提供-196℃的超低溫度,可以長期保存凍存細胞并防止它們受到任何形式的污染或氧化。mve液氮罐
細胞凍存是研究人員和醫(yī)生必須了解和掌握的技能。液氮容器細胞凍存是最常見的凍存方法之一,可以用于保存多種類型的細胞,并且具有保護細胞免受損傷的優(yōu)點。雖然這個過程可能是耗時和繁瑣的,但適當?shù)膬龃婕夹g可以確保您擁有安全、健康的細胞庫并輕松進行實驗和治療。